İlk kez 11 Kasım 1926’da açılan yola bir yıl sonra da ünlü tabelası konmuştur. Orijinal yol ŞikagoIllinois’den başlıyor, Missouri, Kansas, Oklahoma, Teksas, New Mexico, Arizona ve Kaliforniya eyaletlerini katederek Los Angeles şehrinde sona eriyordu. Ülkeyi (ve neredeyse kıtayı) doğudan batıya kateden bu yolun uzunluğu 3.940 kilometreydi.

Tarihi ve turistik bir değeri olan yol popüler kültürde de oldukça geniş bir şekilde yer almıştı. Yolla aynı adı taşıyan ve Bobby Troup’un sözlerini yazıp bestelediği şarkı, aralarında Nat King Cole Trio, Perry Como,Chuck Berry ve The Rolling Stones’un da bulunduğu birçok şarkıcı ve grup tarafından seslendirilmişti. Two-Lane Blacktop gibi varoluşçu kült filmlerden Disney/Pixar’ın Cars’ı gibi animasyon filmlerine kadar sayısız filme ve televizyon dizisine de fon teşkil etmişti.

“U.S. Route 66” 27 Haziran 1985 tarihinde resmen “ABD Karayolları Sistemi”nden çıkartıldı ve bu tarihi yol yerini “Eyaletlerarası Otoyol Sistemi” ne bıraktı.